一次性完成结核分枝杆菌鉴定与利福平耐药突变基因检测的新方法
An Innovative Method for Identificatng Mycobacterium Tuberculosis and Indicating It's Rifampin Resistance Simultaneously
摘要目的 建立一种可同时进行结核分枝杆菌鉴定并检测结核分枝杆菌利福平耐药突变基因的分子方法.方法 以“TGTTCTTCAAGGAGAAGCG”、“TCGTCGGCGGTCAGGTA”为上下游引物对101株结核分枝杆菌复合群及52株非结核分枝杆菌临床分离株进行rpoB基因扩增及序列测定,并应用BLAST数据库和DNAMAN软件进行菌种与rpoB基因突变分析.结果 在153例分枝杆菌临床分离株中,104例鉴定为结核分枝杆菌复合群,49例被鉴定为非结核分枝杆菌,与16SrDNA基因序列鉴定方法符合率为96.73%,与传统分枝杆菌菌种鉴定方法符合率为83%;在104例鉴定为结核分枝杆菌复合群菌株中,54例被检测到rpoB基因突变,与比例法检测利福平耐药表型的符合率为96.15%.结论 应用本引物进行rpoB基因序列分析可以一次性完成结核分枝杆菌鉴定与利福平耐药突变基因检测工作,有较大的临床应用价值.
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