换一批
换一批一步法荧光RT-PCR检测肠道病毒EV71的研究
Development of One-step Fluorescence RT-PCR for Detection of EV71 Enterovirus
摘要目的 建立一种快速准确诊断肠道病毒EV71型的实时荧光定量RT-PCR检测方法.方法 参照NCBI公布的EV71基因序列,设计特异性引物及TaqMan探针;构建阳性重组质粒,验证其最低检测拷贝数、重复性及特异性.结果 试验构建的阳性重组质粒,线性关系在9×102 copies/μL～9×107 copies/μL范围内检测结果良好;用该方法测得最低拷贝数为900 copies/μL,特异性和重复性(CV＜5％)良好,无交叉反应;用该荧光定量RT-PCR检测方法检测80份阳性样品和36份阴性样品,准确率为100％ (116/116).结论 试验建立的实时荧光定量RT-PCR检测方法可用于肠道病毒EV71型的快速检测.
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