换一批TRAIL联合阿霉素诱导肝癌耐药株凋亡的实验研究
Apoptosis of chemoresistant hepatocellular carcinoma cells synergistically induced by TRAIL and adriamycin
摘要目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosisinducing ligand,TRAIL)及TRAIL和阿霉素(ADM)联用对肝癌耐药株诱导凋亡的作用.方法通过浓度递增法用阿霉素处理人肝癌细胞株HepG2获得肝癌耐药株HepG2/ADM.并通过MTT方法鉴定耐药株的耐药性.构建可溶型TRAIL真核表达质粒真核表达质粒pIRES-EGFP-TRAIL.通过脂质体(Lipofectamine)2000介导转染质粒入HepG2/ADM.通过RT-PCR和Western blot证实转染的HepG2/ADM有sTRAIL的mRNA和蛋白的表达后,用MTT方法和Annexin V-FITC-PI染色流式细胞仪检测单纯TRAIL处理和联合阿霉素处理HepG2/ADM的生长抑制率和凋亡率.并用共聚焦显微镜观察处理后细胞凋亡的形态.结果肝癌耐药株筛选成功,sTRAIL质粒构建、转染成功.用MTT测HepG2/ADM抑制率阿霉素处理组40.9%;TRAIL处理组29%;合用组58.4%;联合后抑制率有显著差异.凋亡检测为阿霉素处理组18.37%;TRAIL处理组14.8%;合用组52.71%.但TRAIL处理HepG2 8.9%和HepG2/ADM 8.54%的凋亡率无显著差异.结论TRAIL联合阿霉素能明显增加HepG2/ADM的凋亡从而逆转耐药.同时单纯TRAIL治疗对耐药株作用与亲代细胞作用相仿,说明TRAIL可能有另外的诱发凋亡的途径,受HepG2/ADM耐药性的影响小.
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分类号
R735.7（消化系肿瘤）
栏目名称
DOI
10.3760/cma.j.issn.1673-9752.2005.03.015
发布时间
2005-06-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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