换一批胞内劳森菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立
Development of a TaqMan Quantitative Polymerase Chain Reaction Assay for Detecting Lawsonia intracellularis
摘要为建立猪胞内劳森菌的TaqMan荧光定量PCR检测方法,针对胞内劳森菌的16S rDNA基因设计合成特异性的引物和TaqMan探针,经过优化各项反应条件,建立了TaqMan荧光定量PCR检测方法.该方法仅对胞内劳森菌靶基因有信号,其相关性方程为Ct=-3.318×log(conc)+ 38.840(R2=-0.998),具有良好的线性关系,对标准质粒最低检出量为5.55 copies·μL 1,组内样品的变异系数低于2％.表明该TaqMan荧光定量PCR方法的特异性强、敏感度高、重复性好,具有较好的实用性,能准确定量DNA样品中靶基因的拷贝数,适合于对临床样品中胞内劳森菌定性、定量检测和防治效果的评价.
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