换一批两个紧密连锁的小麦苯丙氨酸解氨酶基因的分离与鉴定
Isolation and Characterization of Two Closely Linked Phenylalanine Ammonia-Lyase Genes from Wheat
摘要利用一个小麦苯丙氨酸解氨酶基因PCR片段为探针,从小麦核DNA基因库中筛选出一个阳性噬菌体克隆,该克隆含有两个高度同源、紧密连锁、转录方向相同的小麦苯丙氨酸解氨酶基因PAL1与PAL2,它们之间的核酸序列同源性为93%,相距约7 kb.利用PAL1特异片段进行Southern分析,表明该基因在小麦基因组中具有多个拷贝.Northern杂交表明,经秆锈菌接种诱导,苯丙氨酸解氨酶基因在一对小麦抗-感近等基因系中差异表达:抗病等基因系中国春-Sr11携带与接种菌无毒性基因P11相对应的抗病基因Sr11,在接种4 d后开始诱导表达,8 d后表达量更高;而缺少抗病基因的感病系中国春-sr11接种6 d后才开始表达,8 d后的表达量与抗病系中6 d时相当.用秆锈菌诱导物和几丁质寡聚物处理小麦悬浮细胞,均可在2 h内激活苯丙氨酸解氨酶基因表达,但真菌诱导物在早期的诱导活性显著高于几丁质寡聚物.从转录水平证实了小麦苯丙氨酸解氨酶基因在秆锈菌诱导的抗性反应中具有重要作用.
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