换一批摘要随着功能基因组研究的需要,新近建立起一项新型高效的基于体内同源重组的遗传工程技术--重组工程技术.重组工程可定义为:基于噬菌体短同源序列重组功能的遗传工程,或者基于同源重组的遗传工程.λ噬菌体Red系统完全不同于传统的依赖RecA的大肠杆菌重组系统,特点是使用长度仅为＜50个碱基的同源臂高效率地催化体内同源重组反应.体内重组过程不再需要预先构建含有同源序列的质粒或噬菌体的中间产物,只需要简单在体外合成寡核苷酸同源序列,或者用PCR方法合成线性打靶序列.重组反应不依赖大肠杆菌RecA系统,不需要限制性内切核酸酶和连接酶,不需要复杂的体外重组操作,可在大肠杆菌体内对染色体DNA、对BAC和PAC质粒或普通质粒载体进行精确的修饰,包括真核或原核细胞基因组DNA的基因敲除、基因敲入、基因克隆和各种突变体的引入.由于该技术具有高效率、简单性和应用的广泛性等独特优点,将来完全有可能取代传统的遗传工程技术.主要介绍了λ噬菌体Red重组酶系统及重组工程在功能基因组研究方面的应用与进展.
更多相关知识
- 浏览207
- 被引62
- 下载67
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
