视网膜色素上皮细胞氧化应激过程中SirT1/STAT3的相互作用
Interactions between SirT1 and STAT3 in the retinal pigmented epithelium cell
摘要目的 探讨去乙酰化酶-1(silent information regulator of transcription 1,SirT1)和信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)在视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞氧化应激过程中的相互作用.方法 体外培养RPE细胞系ARPE-19,H2O2诱导氧化应激.分别采用靶向敲除策略(siRNA/shRNA)沉默SirTl/STAT3基因及采用慢病毒载体(pRC/CMV STAT3及pRC/CMV)转染宿主细胞诱导过表达;采用RT-PCR及Western blot观察基因敲除/过表达状态下SirT1/STAT3表达的相互影响及SirT1/STAT3相互作用对暴露于氧化应激状况下RPE细胞的影响.结果 SirT1激活剂白藜芦醇能显著降低STAT3 mRNA的表达量3.0±0.2(P =0.048);而SirT1基因敲除后,RPE细胞中STAT3 mRNA表达量(6.9±1.1)显著上升(P=0.025);在SirT1基因敲除后RPE细胞氧化应激过程中STAT3蛋白和磷酸化STAT3蛋白表达显著提高,分别为0.990±0.031、0.544±0.019(P =0.000、0.003).氧化应激条件下STAT3过表达能显著诱发SirT1 mRNA表达(0.42±0.16)水平下降(P =0.022);而STAT3敲除后SirT1 mRNA表达量(2.80±0.85)显著增加(P=0.015).结论 RPE细胞氧化应激过程中SirT1对STAT3表达起到负向调节作用,提示在RPE氧化应激过程中SirT1和STAT3之间存在平衡机制.
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