高糖对人晶状体上皮细胞沉默信号调节蛋白6(SIRT6)表达的影响
Expression of silent information regulator 6 (SIRT6)in human lens epithelial cells in high glucose
摘要目的 观察高浓度葡萄糖对人晶状体上皮细胞(SRA01/04)活性及沉默信号调节蛋白6(SIRT6)表达的影响.方法 将SRA01/04细胞在不同葡萄糖浓度(5.5 mmol·L-1、15.5 mmol·L-1、25.5 mmol·L-1、35.5 mmol·L-1、45.5 mmol·L-1、55.5 mmol·L-1、75.5 mmol·L-1)培养基中培养48 h后,用光镜观察SRA01/04细胞形态;CCK-8试剂盒检测各组细胞的活性;Western blot检测各组细胞SIRT6蛋白的表达水平.然后将SRA01/04细胞用55.5 mmol·L-1葡萄糖干预,培养不同时间(0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h)后,Western blot检测不同时间SRA01/04细胞SIRT6蛋白表达水平.免疫荧光技术检测对照组(5.5 mmol·L-1葡萄糖)和高糖组(55.5 mmol·L-1葡萄糖)细胞的SIRT6蛋白表达情况.结果 随着葡萄糖浓度增加,SRA01/04细胞的数量逐渐降低.CCK-8检测结果显示,与5.5 mmol·L-1葡萄糖组相比,随着葡萄糖浓度增加,SRA01/04细胞的活性逐渐降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05).Western blot检测结果显示,SRA01/04细胞的SIRT6蛋白表达与葡萄糖呈浓度和时间依赖性,45.5 mmol·L-1、55.5 mmol·L-1、75.5 mmol·L-1葡萄糖组与5.5 mmol·L-1葡萄糖组比较,以及24 h组、48 h组和72 h组与0 h组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05).细胞免疫荧光结果显示,SRA01/04细胞中的SIRT6蛋白主要在细胞核表达,高糖组SRA01/04细胞中SIRT6蛋白表达较对照组显著降低(P<0.05),且高糖组细胞核出现明显的核固缩和核碎裂现象.结论 高浓度葡萄糖可以降低S RA01/04细胞的增殖活性,降低S I RT6蛋白的表达水平.
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