miR-522促进食管癌增殖和转移的作用机制研究
Study on the mechanism of miR-522 in promoting the proliferation and metastasis of esophageal cancer
摘要目的 研究微小RNA-522(miR-522)对食管癌细胞增殖和转移能力的影响及作用机制.方法 选择2014年1月—2015年6月辽宁省健康产业集团阜新矿总医院心胸外科行食管癌根治性手术患者60例,qRT-PCR检测miR-522在食管癌组织和癌旁组织中的表达;培养食管癌细胞,qRT-PCR检测食管癌细胞系TE-1、TE-8、Eca109和人正常食管上皮细胞系HEEC中miR-522的表达,选择高表达miR-522的食管癌细胞转染miR-522抑制剂.MTS实验检测敲减miR-522对食管癌细胞增殖能力的影响,Transwell实验检测敲减miR-522对食管癌细胞转移能力的影响,流式细胞仪检测敲减miR-522对食管癌细胞周期的影响.Western-blot检测敲减miR-522的表达对食管癌细胞中细胞周期相关蛋白CyclinD1、CDK4、CDK6和上皮间质转化(EMT)相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Snail表达的影响.分析食管癌组织中miR-522的表达与患者临床/病理参数的相关性;Kaplan-Meier生存曲线分析miR-522表达对食管癌患者预后的影响.结果 食管癌组织miR-522表达高于癌旁组织(t/P=4.912/0.000),与人正常食管上皮细胞系HEEC比较,食管癌细胞中miR-522表达增加,在Eca109细胞中表达最高(F/P=40.427/0.000).转染miR-522抑制剂后,食管癌细胞中miR-522的表达降低(t/P=16.334/0.000),细胞增殖和转移能力均降低(t/P=13.426/0.000,7.421/0.001),细胞周期阻滞在G1期(t/P=2.885/0.045).敲减miR-522的表达后,食管癌细胞中CyclinD1、CDK4、CDK6表达降低(t/P=8.521/0.000,5.792/0.002,7.746/0.001);EMT相关蛋白N-cadherin、Snail的表达均降低(t/P=7.359/0.001,8.133/0.000),E-cadherin蛋白表达增加(t/P=6.264/0.002).miR-522高表达水平与患者淋巴结转移和TNM分期相关(t/P=3.360/0.001,2.494/0.016),Kaplan-Meier生存曲线显示,miR-522高表达的食管癌患者预后较差(χ2/P=4.468/0.035).结论 miR-522可能通过调控细胞周期及EMT促进食管癌增殖和转移,miR-522是食管癌治疗的潜在分子靶点.
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