NOD样受体家族蛋白3调控子宫内膜间质细胞催乳素分泌的作用机制
The role and mechanism of NOD-like receptor family protein 3 in regulating prolactin secretion in endome-trial stromal cells
摘要目的 NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)在子宫内膜中的生理性功能研究较少.文中旨在研究NLRP3在子宫内膜间质细胞蜕膜化过程中的表达和调控作用.方法 选自2020年4月至6月在东部战区总医院生殖中心20例不孕症患者的子宫内膜样本.收集人增殖期(n=10)及蜕膜期(n=10)的子宫内膜.另选用SPF级30只6~8周龄雌鼠和10只雄鼠,获取小鼠交配后见栓天数(dpc)0.5~7.5天的子宫内膜,采用Western blot、免疫组化检测NLRP3的表达及定位.体外利用对羟基苯甲酸甲酯(MPA)和8-溴-环腺苷酸(8-Br-cAMP)联合诱导人间质细胞系T-HESCs蜕膜化,检测蜕膜化过程中NLRP3的表达情况.干扰NLRP3的表达后,通过实时荧光定量PCR及ELISA分别检测细胞及其培养上清中蜕膜化标志物催乳素(PRL)的表达情况.结果 免疫组化结果显示,在人蜕膜期子宫内膜中,可见大量NLRP3阳性细胞,蜕膜期NLRP3的表达量较增殖期显著上升.Western blot结果所示,人蜕膜期子宫内膜较增殖期NLRP3显著高表达.免疫组化结果所示,NLRP3在小鼠妊娠早期上调,dpc 3.5天表达最高,可见大量NLRP3阳性细胞表达,细胞质棕黄色深染,之后下降.Western blot结果所示,在小鼠妊娠早期,随着妊娠时间增加,NLRP3表达量先上升后下降,dpc 3.5天达到峰值,与dpc 0.5天和dpc 7.5天比较,差异具有统计学意义(P<0.01).Western blot结果所示,随着诱导人间质细胞蜕膜化时间延长,NLRP3及caspase-1表达量显著升高.与12 h NLRP3、caspase-1蛋白表达量(1.76±0.04、1.28±0.02)比较,0 h(1.00±0.01、0.98±0.01)明显降低,24 h(2.26±0.03、1.95±0.05)明显升高(P<0.05).结论 NLRP3可促进间质细胞蜕膜化过程中PRL的表达和分泌,为研究NLRP3在子宫内膜围种植期调控间质细胞蜕膜化奠定基础.
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