换一批4种冷冻保护剂对人指固有神经的玻璃化保存效果
Experimental Study on Cryopreservation of Human Proper Digital Nerve by Vitrification with Four Cryoprotective Agents Abstract
摘要目的 评估二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)、甘油、丙二醇、乙二醇玻璃化法保存人指固有神经中的保护效果,筛选合适的人指固有神经冷冻保护剂.方法 取截肢手术后患者放弃肢体的指固有神经,分为实验组(30％DMSO组、甘油组、乙二醇组、丙二醇组)和空白对照组进行玻璃化法于液氮(-196℃)中保存3周.复温后进行光学显微镜观察、共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)检测、指固有神经片段的神经生长因子(nerve growth factor,NGF)检测.结果 光镜观察:空白对照组神经鞘膜结构模糊,神经纤维排列疏松、紊乱;实验组神经鞘膜较为完整,神经纤维排列相对整齐、紧凑.LSCM结果:采用钙黄绿素-AM(calcein-AM)和碘化丙啶(propidium iodide,PI)双荧光染色后空白对照组神经纤维绿色荧光强度较弱,红色荧光强度较强.实验组绿色荧光较空白对照组均增强,红色荧光强度均减弱.ELISA检测结果:空白对照组12.95±3.03pg/ml、乙二醇112.64±3.54pg/ml、30％DMSO109.51±9.98pg/ml、甘油61.47±3.34pg/ml、丙二醇62.53±3.64pg/ml.结论 4种冷冻保护剂对人指固有神经的玻璃化法保存均有保护作用,其中乙二醇效果最佳,更适合用于人指固有神经玻璃化保存.
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分类号
R658（外科学各论）
栏目名称
DOI
10.11969/j.issn.1673-548X.2022.07.023
发布时间
2022-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
广东省珠海市医学科研基金资助项目（20191208A010071）
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