换一批摘要目的 获得转金属硫蛋白2 (metallothionein 2,MT2)红花植株,为MT药用蛋白的生产奠定基础.方法 采用Nco Ⅰ/Hind Ⅲ酶切pEASY-oleosin-MT获得oleosin-MT融合基因,将其插入到植物油体高效表达载体pOP上,构建重组质粒pOP-oleosin-MT,进行PCR和双酶切鉴定.采用冻融法将重组质粒pOP-oleosin-MT转入根瘤农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化红花,对转MT基因红花植株进行PCR检测及Southern blotting检测.结果 成功构建了MT基因的植物油体表达载体pOP-oleosin-MT,获得了3株PCR检测呈阳性的转MT基因红花植株.结论 建立了完善的红花再生体系,获得了转MT基因的红花植株.
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关键词
红花金属硫蛋白油体Southern blotting检测根瘤农杆菌重组质粒safflowermetallothioneinoil-bodySouthern blottingArabidopsis thaliana (L.) Heynhrecombinant plasmid
分类号
R282.12（中药学）
栏目名称
DOI
10.7501/j.issn.0253-2670.2016.12.023
发布时间
2016-09-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家高技术研究发展计划（863计划）（863;2011AA100606）
国家自然科学基金（31201237）
:吉林省教育厅十三五科学技术研究项目
吉林农业大学大学生创新创业项目（201610193046）
吉林农业大学大学生创新创业项目（201410193045）
:吉林省科技厅中青年领军人才
优秀创新团队项目（20111815）
高等学校博士学科点专项科研基金(青年教师类)（20122223120002）
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