人鼻咽癌细胞系HONE1的蛋白质双向凝胶电泳分析
Two-dimensional gel electrophoresis analysis of proteins from human nasopharyngeal carcinoma cell line HONE1
摘要目的:研究人鼻咽癌细胞系HONE1的蛋白质表达特征.方法:抽提鼻咽癌细胞系HONE1总蛋白,双向凝胶电泳(2-DE)分离、银染显色,用凝胶成像仪和PDQUEST软件获取HONE1总蛋白的2-DE图像;根据获得的2-DE凝胶图像,从胶上切取分辨良好、染色较浓的蛋白质点,用胰蛋白酶原位水解,所获酶解肽段经基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定Mr;以测得的肽段Mr为肽质量指纹(PMF),通过PepIdent软件搜索SWISS-PROT和TrEMBL数据库而识别该点对应的蛋白质.结果:建立了双向凝胶电泳分离总蛋白、质谱鉴定银染蛋白质点的方法,并鉴定出人鼻咽癌细胞系HONE1中表达较强的10个点相应的蛋白质.结论:本研究为建立人鼻咽癌细胞HONE1的2-DE参考图和蛋白质数据库提供了有用的基础性研究资料,为进一步识别鼻咽癌特异性的蛋白质奠定了实验基础.
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