换一批
换一批RNA干扰下调不同肿瘤细胞表皮生长因子受体表达及其意义
RNA interference mediated inhibition of epidermal growth factor receptor expression and its significance in different human cancer cell lines
摘要背景与目的:表皮生长因子受体在多种上皮源性肿瘤中过表达,与肿瘤的发生、发展密切相关,是肿瘤治疗的重要靶点.本研究采用针对EGFR的小干扰RNA(siRNA),探讨其在不同类型肿瘤细胞A431、HeLa、SPC-A-1中的RNA干扰效应.方法:化学合成针对EGFR的siRNA,转染A431、HeLa、SPC-A-1细胞,通过定量RT-PCR、免疫荧光染色和流式细胞仪检测EGFR表达;通过集落形成实验观察细胞集落形成能力,分析不同类型肿瘤细胞的RNA干扰效应.结果:转染siRNA-EGFR后,3种肿瘤细胞的EGFR表达均明显下调.在A431细胞,其mRNA水平下调73.9%,蛋白水平下调77.0%.在HeLa和SPC-A-1细胞,mRNA水平的下调分别为44.6%和57.7%,蛋白水平下调61.3%和65.2%.EGFR下调后细胞集落形成能力均出现抑制,A431、HeLa和SPC-A-1的集落形成抑制率分别为27.2%、53.9%和59.1%.结论:siRNA-EGFR可在不同类型肿瘤细胞中产生RNA干扰效应,抑制细胞集落形成能力.RNA干扰技术在开发广谱抗肿瘤靶向治疗药物中具有应用价值.
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