Tiam 1反义寡核苷酸转染对胃癌细胞体内外侵袭转移能力的影响
Effects of Tiam 1 antisense oligodeoxynucleotides transfection on the invasive and migratory potentials of gastric cancer cells in vitro and vivo
摘要背景与目的:作为细胞骨架结构调节因子,T淋巴瘤侵袭转移诱导因子Ⅰ(Tiam 1)与胃肠道肿瘤侵袭转移密切相关.本研究应用反义寡核苷酸(ASODN)转染技术,特异抑制胃癌细胞中Tiam 1表达,进而观察对胃癌细胞体内、外侵袭转移能力的影响.方法:采用层粘连蛋白黏附法,由胃癌MKN-45细胞株(M0)中筛选获得高侵袭转移亚株(MH).以脂质体介导将Tiam 1 ASODN转染至MH细胞中,并应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及定量细胞EUSA技术分别检测Tiam 1 mRNA和蛋白的表达.应用Boyden小室及裸鼠接种法分别观察ASODN转染后MH细胞在体内、外侵袭转移能力方面的改变.结果:应用0.43μmol/L Tiam 1 ASODN转染能特异性抑制胃癌MH细胞中Tiam 1 mRNA和蛋白表达(0.162±0.018,0.982±0.119),与脂质体转染组(0.789±0.054,1.237±0.108)、正义寡核苷酸(SODN)-脂质体转染组(0.754±0.039,1.234±0.103)、未转染组(0.801±0.065,1.290±0.182)相比,分别约为后三者的20.2%~21.5 %、76.1%~79.6%(P<0.05).ASODN转染组细胞的体外侵袭、移行能力(10±3、21±9)较SODN转染组(27±10、56±13)、未转染组(26±6、53±12)明显受抑制(P<0.05),同时ASODN转染组细胞在裸鼠体内的肺转移率(1/5=20%)也较SODN转染组(4/5=80%)、未转染组(4/5=80%)显著下降(P<0.05).结论:特异性ASODN转染可有效抑制Tiam 1在胃癌细胞中的表达并削弱其体内、外侵袭转移能力.
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