换一批食管癌Eca9706细胞中KRT19基因的甲基化及表达
Methylation and expression of KRT19 gene in esophageal Eca9706 cell line
摘要背景与目的:KRT19基因位于17q21.2,编码CK19蛋白.KRT19基因启动子的甲基化在肾癌、神经母细胞瘤中已有报道,而在食管癌中鲜见相关报道.本文研究甲基转移酶抑制剂5-氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对食管癌Eca9706细胞株生长活性的影响,并探讨5-Aza-CdR对食管癌Eca9706细胞株KRT19基因甲基化及其表达的影响.方法:用MTT比色法检测不同浓度5-Aza-CdR处理前后Eca9706细胞的生长活性；用结合重亚硫酸盐的限制性内切酶法(combined bisulfite restriction analysis,COBRA)检测应用5-Aza-CdR后与未用药对照组细胞的KRT19基因甲基化状态；用Western blot法检测应用5-Aza-CdR后与未用药对照组细胞的KRT19基因蛋白的表达情况.结果:5-Aza-CdR对食管癌Eca9706细胞系的增殖有抑制作用,且呈时间、浓度依赖性；食管癌Eca9706细胞株存在KRT19基因启动子区的甲基化；对照组无KRT19蛋白的表达,应用5-Aza-CdR后可以恢复其蛋白表达.结论:5-Aza-CdR抑制食管癌Eca9706细胞的增殖；5-Aza-CdR可以逆转KRT19基因启动子区的甲基化,恢复其蛋白表达,KRT19基因启动子区的甲基化可能是其失表达的重要机制.这为食管癌诊疗提供了一个新的靶点.
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