换一批靶向沉默HOXA9基因对U937细胞体内外增殖的影响
Effects of RNA interference targeting HOXA9 on the proliferation of U937 cells in vitro and in vivo
摘要背景与目的:多数急性髓系白血病(acute myelocytic leukemia,AML)患者高表达同源盒A9(homeoboxA9,HOXA9),而HOXA9高表达与患者预后差有关.本研究探讨慢病毒载体介导shRNA(short harpin RNA,siRNA前体)靶向沉默HOXA9基因对人急性单核白血病细胞株U937细胞在体内外增殖的影响.方法:将U937细胞分为干扰组、阴性对照组、空白对照组,转染效率>90%时,经蛋白质印迹法(Western blot)测定对HOXA9基因的沉默作用;FCM检测各组细胞周期的变化;绘制各组细胞生长曲线.将32只裸鼠腹腔接种U937细胞,随机分为4组,即阴性对照组、干扰组、阴性对照联合VCR组、干扰联合VCR组,每组8只,每只裸鼠腹腔注射环磷酰胺100 mg/kg,连续4 d.1周后向阴性对照联合VCR组和干扰联合VCR组裸鼠的腹腔注射VCR 0.5 mg/kg,每周1次,连续4周.观察各组裸鼠的生存期.结果:流式细胞仪测得慢病毒对U937细胞的转染效率>90%,干扰组HOXA9的蛋白表达水平为46.56%±3.54%,较空白对照组和阴性对照组均下降(P<0.05).干扰组细胞被阻滞于G0/G1期,其增殖明显受到抑制.慢病毒干扰HOXA9基因的表达联合VCR可显著延长裸鼠的生存期.结论:以慢病毒载体介导shRNA靶向沉默HOXA9基因表达,可明显抑制U937细胞在裸鼠体内外的增殖.
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