换一批放射线诱导的HtrA2基因表达对人葡萄膜黑色素OCM-1细胞的影响
The effect of up-regulation of HtrA2 gene expression via radiation in human uveal melanoma cells
摘要背景与目的：葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma，UM)是成人最常见的眼内原发性恶性肿瘤，其恶性程度高，转移早。放射治疗是多年来葡萄膜黑色素瘤最常用的方法之一，但辐射抗性和受照部位正常组织的损伤是长期困扰UM放疗的问题。本实验运用放射线可调控的HtrA2基因联合疗法，探讨其对UM的抑制作用。方法：含Egr1启动子的pIRES-Egr1-Omi/HtrA2(pEgr1-HtrA2)质粒体外转染入OCM-1细胞，转染后的细胞暴露于不同剂量的放射线中。将移植瘤模型小鼠分为对照组、放射组、基因组和基因放射组，每组10只。应用实时定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测HtrA2基因的mRNA表达和蛋白表达。流式细胞仪检测联合处理后的OCM-1细胞凋亡情况。通过克隆形成实验检测HtrA2基因对放射敏感性的影响。在动物实验中测量联合治疗后肿瘤体积。结果：转染pEgr1-HtrA2质粒后，放射组HtrA2 mRNA表达在8 Gy达到高峰，且HtrA2蛋白表达较放射前明显增加(P<0.05)，OCM-1细胞凋亡显著增加。克隆形成实验显示，HtrA2基因可增强OCM-1细胞放射敏感性。与对照组相比，基因放射组肿瘤生长被显著抑制(P<0.05)。结论：转染pEgr1-HtrA2质粒后可在放射线调控下增加HtrA2基因表达，并能增强OCM-1细胞对放射的敏感性，抑制肿瘤细胞生长。
更多相关知识
- 浏览670
- 被引2
- 下载52
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
