低剂量亚硝酸钠诱导CHL细胞DNA损伤的适应性反应
The adaptive response of low dose sodium nitrite pretreatment on cultured CHL cells to DNA damage caused by high dose sodium nitrite
摘要目的:研究低剂量亚硝酸钠(NaNO2)诱导CHL细胞DNA损伤的适应性反应及其形成机制.方法:采用单细胞凝胶电泳试验检测DNA的损伤程度.分别以浓度为0.01mg/L、0.1mg/L和1mg/L的NaNO2预处理CHL细胞6h后,观察细胞对随后的1g/L冲击剂量NaNO2的适应性反应;用3-氨基苯甲酰胺(3-AB)分别在低剂量预处理前和预处理6h后抑制聚ADP核糖聚合酶(PARP-1)的活性,观察其对适应性反应的阻断情况.结果:未经低剂量预处理的细胞,接触1g/L的NaNO218h后,DNA损伤较严重,其细胞拖尾率为7.87%,明显高于正常对照组(P<0.01);浓度为0.01mg/L和0.1mg/L的NaNO2预处理CHL细胞后,可明显缓解1g/L冲击剂量的NaNO2对CHL细胞DNA的损伤作用,其细胞拖尾率分别为3.55%和1.06%,明显低于未经低剂量NaNO2预处理组细胞的拖尾率(P<0.05;P<0.01);而经1mg/L的NaNO2预处理的细胞,接触1g/L的NaNO218h后,DNA损伤较严重,其细胞拖尾率为6.09%,与未经低剂量NaNO2预处理组细胞的拖尾率相比,差异无显著(P>0.05).距离指标及复合指标也有相同趋势.在低剂量NaNO2预处理细胞前采用3AB抑制PARP-1活性可阻断适应性反应的产生;而在低剂量NaNO2预处理细胞6h后再用3AB抑制PARP-1活性,则不会阻断适应性反应的产生.结论:浓度等于或低于0.1mg/L的NaNO2可通过激活PARP-1诱导CHL细胞DNA损伤的适应性反应,而且,能诱导适应性反应的剂量很可能对机体DNA不造成损伤.
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