微量全血彗星实验法的建立及在生物监测中的初步应用
A new approach for directly using micro-whole blood specimen in comet assay and its application in biomonitoring
摘要目的建立一种简捷、实用的末梢血样直接用于彗星实验的新技术.方法按随机、对照及重复的实验原则,于早、中、晚时段分别采集6只昆明种雄性小鼠的尾血,每次取血样3 μl/只进行彗星实验.电泳条件设置为电压25 V,电流130 mA,DNA碱性解旋与电泳各30 min.并以小样本人群对新建方法的有效性进行了初步验证.结果①小鼠尾全血彗星图像清晰、对比度高,阳性与阴性对照组的拖尾率总体差异明显,重现性良好;②本方法可用于检测吸烟人群的DNA断裂损伤,并能在损伤程度上(拖尾率与尾长2项指标明显)与非吸烟人群相鉴别.结论基本建立了微量全血彗星实验法,但其实用性有待进一步验证和完善.
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