换一批摘要为构建一种灵敏、特异、准确的迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)检测方法,以gyrB为靶基因设计特异性引物和探针,经过优化反应体系和退火温度,建立了迟缓爱德华氏菌荧光PCR方法.随后对该方法的敏感性、特异性和重复性进行了评估,并应用该方法进行临床样品检测.结果显示:当引物和探针浓度分别为250和200 nmol/L,退火温度为55℃时,建立的迟缓爱德华氏菌荧光PCR方法荧光曲线标准,线性关系良好,最低检测限可达 12.4 CFU/mL,且 1 CFU/mL的细菌经 35℃培养 1 h后即可被检出;与猪链球菌 2 型以及无乳链球菌等 14 种常见水生动物病原体无交叉反应;重复性试验变异系数均小于0.95%;在 100 份临床样品中,检出阳性22份,与细菌分离鉴定结果一致.结果表明,本研究建立的迟缓爱德华氏菌荧光PCR检测方法敏感性高、特异性强、重复性好,为迟缓爱德华氏菌病的临床诊断和研究提供了技术支撑.
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关键词
迟缓爱德华氏菌荧光PCR线性关系特异性变异系数临床应用Edwardsiella tardafluorescent PCRlinearityspecificitycoefficient of variationclinical application
分类号
S851
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1005-944X.2024.09.017
发布时间
2024-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
东莞市省乡村振兴战略专项（20211800400112）
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