换一批
换一批抗人肺腺癌单抗5F-11噬菌体抗体库的构建及表达
The construction and expression of phage display library of anti human lung adenocarcinoma monoclonal antibody 5F-11
摘要目的构建抗人肺癌单抗5F-11的噬菌体显示文库.方法利用RT-PCR方法从5F-11杂交瘤细胞扩增抗体轻重链可变区基因,用连接子连接成为ScFv基因后克隆至噬菌体载体pCANTAB5E.以肺腺癌细胞系A2为抗原进行4轮筛选,得到富集的次级噬菌体表达文库.结果制备了库容为8×107 pfu/ml的噬菌体展示文库.随机抽取未经筛选的克隆进行酶切,酶切图谱呈多样性,富集后的酶切图谱则显示特异构型的噬菌体得到富集.检测30个噬菌体克隆上清,其中23个与A2细胞有较强反应.结论本研究获得了抗人肺腺癌单抗5F-11的单链抗体,为拓展抗体的应用创造了条件.
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