p53调控的肺癌细胞顺铂敏感性相关基因片段的分离和克隆
Effect of exogenous wild type p53 expression on sensitization of lung cancer cell line to cisplatin and cloning of the corresponding genes
目的克隆野生型p53(wtp53)影响人大细胞肺癌801-D 细胞系顺铂敏感性相关基因片段.方法采用转基因方法补偿801-D细胞p53功能,分别提取经IC50浓度顺铂刺激的转染wtp53细胞、空载细胞和未经顺铂作用的转wtp53细胞RNA,用银染mRNA差异显示方法分离差异表达基因,反转录点杂交和巢式PCR进行确证.阳性片段进行克隆及序列分析.结果获得6条阳性片段,2条含有开放阅读框架(ORF),其中1条片段部分与核糖核苷还原酶α链有56%同源性,另一片段D1含有一个长ORF,与已知cDNA序列同源率佷低.结论 p53对801-D细胞顺铂敏感性的影响有明显的基因水平改变,可能诱导了相关基因表达.
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