抗VEGF165核酶对人肺腺癌细胞生物学特性的影响
Effect of anti-VEGF165 ribozyme on biological behaviors of human lung adenocarcinoma cell
摘要目的探讨抗血管内皮生长因子165(VEGF165)核酶对人肺腺癌细胞生物学特性的影响.方法设计合成针对VEGF165212位点的锤头状核酶(vascular endothelial growth factor ribozyme, VRz)及其突变体(mutant VRz, mVRz),体外检测核酶的剪切活性.采用亚克隆技术,构建腺病毒介导的抗VEGF165核酶真核表达载体pAdVRz,用重组腺病毒感染人肺腺癌细胞A549,分别采用Northern blot印迹杂交、流式细胞仪、透射电镜和激光共聚焦等技术,观察感染前后A549细胞的生物学性状的改变.结果成功地合成了具有明显剪切活性的抗VEGF165核酶VRz及其重组腺病毒表达载体rpAdVRz,并在A549细胞中获得表达.重组腺病毒感染细胞的VEGF165表达减少了87%,而生物学性状不受外源基因表达的影响.结论抗VEGF165核酶能够显著抑制人肺腺癌细胞内VEGF165的表达,为进一步进行肺癌的抗血管治疗提供了实验基础.
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