换一批
换一批婴儿双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统的构建
Construction of Bifidobacterium Infantis/CD tumor targeting gene therapy system
摘要目的构建婴儿双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统.方法 PCR扩增胞嘧啶脱氨酶(CD)基因, TSS法在大肠杆菌JM109中扩增pGEX-1LambdaT质粒, EcoRⅠ和BamHⅠ对CD基因和pGEX-1LambdaT质粒分别进行双酶酶切.琼脂糖电泳凝胶分离并切取其中4.9 kb和1.3 kb两个片段长度的凝胶.凝胶DNA提取试剂盒提取其中所含的DNA片段,T4 DNA连接酶连接这两个片段,最后用电穿孔法将重组片段转染婴儿双歧杆菌,并挑选阳性菌落,提取质粒双酶切后进行琼脂糖凝胶电泳检测.结果应用电穿孔法转染婴儿双歧杆菌,获得含6.2 kbp重组质粒的阳性转染婴儿双歧杆菌.结论成功构建婴儿双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统.
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