hnRNP A2/B1基因克隆及在肺癌组织中表达的初步探讨
Cloning of hnRNP A2/B1 gene and detection of its expression in lung cancer tissues
摘要背景与目的目前肺癌治疗中存在无早期特异性诊断指标的难题.本研究旨在获得hnRNPA2/B1 cDNA序列,研究其在肺癌组织中的表达情况,为肺癌早期诊断治疗提供实验依据.方法从培养的A549肺腺癌细胞中提取总RNA进行逆转录反应,经PCR扩增目的片段,将其克隆于PUCm-T质粒上,并经酶切电泳、DNA测序鉴定分析.采用原位杂交方法,利用特异的cDNA探针,检测41例肺癌、13例非肺癌组织中hnRNP A2/B1的表达情况.结果从培养的A549肺腺癌细胞提取的总RNA中扩增到目的片段,并经测序证实该片段为hnRNP A2/B1编码序列.原位杂交显示肺癌组hnRNP A2/B1阳性率为87.8%(36/41),显著高于非肺癌组23.1%(3/13)(P<0.01).其在胞浆、胞核均有表达,主要在胞浆表达.四种类型肺癌组织均显示hnRNP A2/B1阳性染色,其中鳞癌细胞染色阳性率为91.3%(21/23),似高于腺癌细胞78.6%(11/14),但两组间无显著性差异(P >0.05).结论hnRNP A2/B1可以被成功克隆.初步证实hnRNP A2/B1在肺癌组织中呈高表达,但与肺癌组织类型无明显关系.
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