换一批
换一批COX-2反义核酸对H1299细胞增殖及顺铂敏感性的影响
Effects of cyclooxygenase-2 antisense vector on proliferation and sensitivity to cisplatin of H1299 cells
摘要背景与目的目前已知环氧化酶-2(COX-2)在非小细胞肺癌(NSCLC)的浸润、发展及转移中有重要意义,抑制COX-2的表达可能抑制NSCLC的发生及发展.用反义COX-2重组载体转染高表达COX-2的人非小细胞肺癌细胞株H1299,观察其对H1299细胞的生长抑制作用及顺铂敏感性的影响.方法通过脂质体介导将COX-2反义核酸质粒转入H1299细胞,经氨基糖苷磷酸转移酶(Geneticin,G418)筛选获得稳定表达COX-2反义核酸的NSCLC转染细胞系;采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测COX-2 mRNA的表达水平;应用蛋白质印迹分析(Western Blot)技术检测COX-2蛋白表达水平的变化;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测COX-2反义核酸对H1299细胞增生的影响及其对H1299细胞的顺铂敏感性的影响.结果反义COX-2基因转染后的H1299细胞中COX-2 mRNA表达水平明显下调,COX-2蛋白表达水平明显减低.转染后的H1299细胞的生长速率明显下降(P＜0.05),对顺铂的半数存活浓度(IC50)值由转染前的3.8mg/l降低为1.8mg/l(P＜0.05).结论 COX-2反义核酸导入不仅可抑制H1299细胞的增生,而且可增加H1299细胞对顺铂的敏感性.
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