非小细胞肺癌细胞株TGFBR3基因缺陷表达及其分子机制研究
Defective Expression of TGFBR3 Gene and Its Molecular Mechanisms in Non-small Cell Lung Cancer Cell Lines
摘要背景与目的 国外有研究表明,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中转化生长因子受体III(TGFBR3)存在缺陷表达,但是分子机制尚未明确.本研究以正常支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cell,HBEpiC)为对照,分析NSCLC细胞株中TGFBR3基因的表达情况,并探讨TGFBR3基因表达失活的分子机制.方法 采用Western blot检测HBEpiC和NSCLC细胞株中TGFBR3的表达情况并做相对定量分析;采用DNA直接测序检测TGFBR3基因启动子基本转录元件区的突变情况;应用亚硫酸氢钠处理后测序法(bisulfite sequence-PCR, BSP)检测TGFBR3基因启动子区甲基化状态.结果 NSCLC细胞株中TGFBR3表达水平明显低于HBEpiC;高转移细胞株95D明显低于非转移细胞株LTEP-α-2、A549、NCI-H460;HBEpiC与NSCLC细胞株中TGFBR3基因近端启动子区-165到-75区域无遗传突变,且未见甲基化,远端启动子区-314到-199区域均为高甲基化.结论 TGFBR3基因在NSCLC细胞株中表达下调,在高转移细胞株95D中尤其明显,提示该基因的表达缺陷对NSCLC发生发展起重要作用,可能与NSCLC的侵袭和转移相关;然而,TGFBR3基因启动子区重要转录元件区域的甲基化状态并不是导致TGFBR3基因表达下调的主要原因.
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