Vegfr2-luc转基因子代小鼠的鉴定

Identification of the Offspring of Vegfr2-1uc Transgenic Mouse

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摘要背景与目的Vegfr2-Iuc转基因小鼠体内血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor recep-tot 2,VEGFR2)的表达可以驱动荧光素酶报告基因(luciferase,luc)的表达,是活体动物水平实时监测血管生成情况的有利工具.本研究旨在对子代Vegfr2-luc转基因小鼠进行鉴定,以确定能否用于血管生成研究.方法PCR检测新生小鼠基因组内luc基因;利用活体成像技术观察新生Vegfr2-luc转基因小鼠生长发育过程中以及皮肤伤口修复过程中luc基因表达水平的变化情况;荧光素酶报告基因检测试剂盒检测成年(8N龄)转基因小鼠各脏器荧光素酶的活性和Real-time PCR检测各器官VEGFR2 mRNA的表达水平.结果 PCR结果显示50%(56/112)的新生小鼠携带luc基因.活体成像结果显示随着Vegfr2-luc转基因小鼠发育成熟,luc表达量逐渐降低(P<0.001);在皮肤伤口修复过程中,伤口处luc表达水平先增强后降低(P<0.001).雌性成年转基因小鼠各脏器VEGFR2 mRNA的表达水平与荧光素酶活性呈正相关(r=0.948,P<0.001).将睾丸组织除外,雄性成年转基因小鼠各脏器vEGFR2 mRNA的表达水平与荧光素酶活性同样呈正相关(r=0.836,P<0.001).结论 Vegfr2-luc转基因子代小鼠体内luc表达水平的变化可以反映VEGFR2的表达情况.