miR-614通过调控靶基因PSA表达抑制人肺癌细胞的侵袭和增殖能力
MiR-614 Inhibited Lung Cancer Cell Invasion and Proliferation via Targeting PSA
摘要背景与目的 MicroRNAs(miRNAs)是一种非编码的小分子RNA,在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要的作用,各种miRNAs对肺癌的作用及机制仍需进一步阐明。本研究探讨了miR-614对肺癌细胞增殖和侵袭的作用及机制。方法应用实时定量PCR检测miR-614在高低不同转移能力肺癌PGCL3和PGLH7细胞中的表达水平;脂质体2000介导分别转染miR-614类似物和抑制物入PGCL3和PGLH7细胞,应用Transwell实验检测miR-614对肺癌细胞侵袭的作用;应用CCK8实验和BrdU掺入实验检测miR-614对肺癌细胞增殖的作用;生物信息学软件预测miR-614潜在的靶基因,双荧光素酶报告基因验证miR-614是否作用于嘌呤霉素敏感性氨肽酶(puromycin-sensitive aminopeptidase, PSA)mRNA的3’UTR区预测靶位;Western blot检测PSA蛋白水平。结果 miR-614在高转移肺癌细胞PGCL3中的表达水平明显低于其在低转移肺癌细胞PGLH7的表达水平;体外侵袭实验结果显示,miR-614可抑制肺癌细胞侵袭;细胞增殖实验结果显示,miR-614可抑制肺癌细胞增殖;miRanda软件预测并经双荧光素酶报告基因验证PSA是miR-614的靶基因;miR-614类似物可下调PSA蛋白表达,miR-614抑制物可上调PSA蛋白表达。结论 miR-614过表达抑制了人肺癌细胞的侵袭和增殖能力,PSA是miR-614下游靶基因之一。
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