pVAX-WIF-1真核表达载体的构建及其抗肺癌作用-论文-万方医学网

pVAX-WIF-1真核表达载体的构建及其抗肺癌作用

Construction of pVAX-WIF-1 Eukaryotic Expression Vector and Its Anti-tumor Effect on Lung Cancer

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摘要：

背景与目的 WIF-1是肺癌中重要的抑癌基因之一，其编码蛋白WIF-1能够通过抑制Wnt/β-catenin信号通路达到抑制肿瘤生长增殖及促进凋亡等抗肺癌作用。本研究旨在利用美国食品和药品管理委员会认可用于临床治疗的pVAX载体，构建pVAX-WIF-1真核表达载体，初步探究pVAX-WIF-1在体内外对A549肺癌细胞的抗肿瘤作用。方法应用PCR方法扩增人WIF-1编码序列片段，构建pVAX-WIF-1载体后转染肺癌A549细胞，Western blot检测WIF-1基因的表达；采用MTT法、Hoechst3235染色和流式细胞术分别检测pVAX-WIF-1在体外对肺癌A549细胞增殖、凋亡作用的影响；构建A549小鼠皮下瘤模型，探究pVAX-WIF-1在体内的抗肺癌作用。结果真核表达质粒载体pVAX-WIF-1构建成功，pVAX-WIF-1转染A549细胞后，WIF-1蛋白表达升高。pVAX-WIF-1转染A549后能抑制细胞增殖和诱导凋亡。动物体内结果表明，pVAX-WIF-1能有效抑制肺癌肿瘤生长。结论本研究成功构建了pVAX-WIF-1真核表达质粒，pVAX-WIF-1能明显抑制A549肺癌细胞增殖和促进凋亡，有效抑制A549皮下瘤生长。本研究将为WIF-1基因的肺癌临床治疗奠定了基础。

作者：安宁 ^[1] 罗心梅 ^[2] 叶苏娟 ^[2] 王宇 ^[2] 杨蔚菡 ^[2] 蒋倩倩 ^[2] 朱文 ^[2]

作者单位： 610072成都，四川省医学科学院，四川省人民医院肿瘤科 ^[1] 四川大学华西医院/生物治疗国家重点实验室,成都,610041 ^[2]

期刊：《中国肺癌杂志》2015年7期 409-415页 MEDLINEISTICPKUCSCD

关键词：肺癌 WIF-1基因 A549 基因治疗真核表达载体 Lung cancer WIF-1 A549 Gene therapy Eukaryotic expression vector

主题词：肺肿瘤(Lung Neoplasms)基因(Genes)肿瘤(Neoplasms)基因治疗(Genetic Therapy)生长(Growth)

栏目名称： 基础研究

DOI： 10.3779/j.issn.1009-3419.2015.07.04

发布时间： 2015-08-07

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被引：7
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