ANTP-SmacN7融合肽对H460细胞的辐射增敏作用

Radiosensitization Induced by ANTP-SmacN7 Fusion Peptide in H460 Cell Line

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摘要背景与目的肿瘤的辐射耐受制约了放疗疗效，第二个线粒体衍生的半胱氨酸蛋白酶激活剂（Second mitochondria-derived activator of caspase, Smac）蛋白类似物可明显提高辐射诱导的肿瘤细胞凋亡，有望成为新型肿瘤辐射增敏药物。本研究旨在探讨新型Smac蛋白类似物ANTP-SmacN7融合肽对肺癌细胞系H460的辐射增敏作用。方法合成ANTP-SmacN7融合肽，连接荧光素FITC以观察融合肽能否进入细胞。对数生长期H460细胞分为空白对照组、单纯照射组、ANTP-SmacN7组和照射联合ANTP-SmacN7组，单纯照射组给予0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy照射，照射联合ANTP-SmacN7组中ANTP-SmacN7的浓度为20μmol/L，WST-1测定H460细胞的增殖。流式细胞仪测定细胞处理后24 h和48 h的细胞凋亡率。Western blot实验检测caspase3和cleaved caspase3的表达水平。结果 ANTP-SmacN7融合能够顺利进入细胞，且能够增强H460细胞的辐射敏感性（F=25.1，P<0.01，增敏比为1.86），照射联合ANTP-SmacN7可明显降低H460细胞的克隆形成率（χ2=45.2,P<0.01；χ2=40.3,P<0.01），提高cleaved caspase3的表达量，促进caspase3的活化，增加辐射诱导的细胞凋亡率。结论 ANTP-SmacN7融合肽可明显提高H460细胞的辐射敏感性，作为一种新的Smac蛋白类似物有望用于肿瘤的辐射增敏治疗。

作者刘宝娜 ^[1] 杜利清 ^[1] 徐畅 ^[1] 王彦 ^[1] 王芹 ^[1] 宋志仪 ^[2] 孙晓辉 ^[1] 王津晗 ^[1] 刘强 ^[1] 学术成果认领

作者单位 300192天津，中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所，天津市放射医学与分子核医学重点实验室 ^[1] 天津市中医药研究院附属医院,天津,300120 ^[2]

关键词 Smac蛋白肿瘤细胞细胞凋亡辐射敏感性 Smac protein Tumor cell Apoptosis Radiosensitivity

主题词细胞(Cells)辐射(Radiation)肿瘤(Neoplasms)蛋白(Egg White)细胞凋亡(Apoptosis)

栏目名称 基础研究

DOI 10.3779/j.issn.1009-3419.2016.05.01

发布时间 2016-06-17

基金项目

国家自然科学基金项目 天津市自然科学基金项目(No.13JCYBJC23500, No.13JCQNJC11600)资助@@@@This study was supported by the grants from the National Natural Science Foundation of China the Natural Science Foundation of Tianjin, China (all to Qiang LIU)