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环状RNA CircHIPK3通过miR-379调控IGF1表达促进非小细胞肺癌细胞系NCI-H1299与NCI-H2170的细胞增殖

Circular RNA CircHIPK3 Promotes NCI-H1299 and NCI-H2170 Cell Proliferation through miR-379 and its Target IGF1

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摘要背景与目的已有的研究证明:环状RNA是一类在哺乳动物中普遍存在的具有稳定闭合环状结构的内源性RNA分子.环状RNA circHIPK3(circular RNA HIPK3,circHIPK3)在肝细胞癌(hepatocellular carcino-ma,HCC)中表达水平较高,促进肝癌细胞生长.但是其在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的作用及其调控机制尚无文献报道.本研究拟探讨环状RNA circHIPK3对NSCLC细胞系NCI-H1299和NCI-H2170细胞增殖的影响,并进一步研究其调控的分子机制.方法 Real-time PCR法检测circHIPK3在NSCLC各细胞系中的表达水平.CCK-8实验和克隆形成实验检测过量表达和干扰circHIPK3对细胞增殖的影响.双荧光素酶报告基因实验分别检验miR-379与circHIPK3及miR-379与IGF1 mRNA的结合情况.Western blot和ELISA检测细胞内外的IGF1蛋白表达水平.结果环状RNA circHIPK3在6株NSCLC细胞株中均有表达,其中H1299表达最低,H2170表达最高,通过转染过表达的circHIPK3可显著促进NCI-H1299细胞增殖,干扰circHIPK3可显著抑制NCI-H2170细胞增殖.miR-379可与circHIPK3及IGF1 mRNA直接结合.过表达circHIPK3导致IGF1表达量上调,干扰circHIPK3能够下调IGF1表达水平,转入miR-379 mimics恢复了circHIPK3稳转细胞株IGF1表达水平的上调及细胞增殖表型.结论环状RNA circHIPK3在NSCLC细胞系NCI-H1299及NCI-H2170中可通过miR-379调控IGF1表达促进细胞增殖,环状RNA circHIPK3可能成为非小细胞肺癌治疗的新靶点.

作者田芳 ^[1] 王云 ^[2] 肖哲 ^[2] 朱学军 ^[3] 学术成果认领

作者单位 361000 厦门,厦门大学生命科学科学院,细胞应激生物学国家重点实验室;210029 南京,南京中医药大学附属江苏省中医院呼吸科 ^[1] 361000 厦门,厦门大学生命科学科学院,细胞应激生物学国家重点实验室 ^[2] 南京中医药大学附属江苏省中医院呼吸科, 南京,210029 ^[3]

关键词肺肿瘤环状RNA CircHIPK3 增殖 Lung neoplasms Circular RNA CircHIPK3 Proliferation

主题词细胞增殖(Cell Proliferation)癌, 非小细胞肺(Carcinoma, Non-Small-Cell Lung)细胞系(Cell Line)肺肿瘤(Lung Neoplasms)细胞(Cells)

栏目名称

基础研究

DOI 10.3779/j.issn.1009-3419.2017.07.04

发布时间 2017-08-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家自然科学基金项目(No.30670917)资助This study was supported by the grant from the Affiliated Hospital of Nanjing University of Chinese Medicine (to Xuejun ZHU)（30670917）