miR-367-3p靶向ZEB2抑制NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭生物学功能研究
miR-367-3p Regulates Cells Proliferation and Invasion in NSCLC by Targeting ZEB2
摘要背景与目的 微小RNA在肺癌的发生发展及生物学表型中发挥重要作用.探讨miR-367-3p在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者中的表达及其对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 选取我院收治并手术治疗的NSCLC患者22例(其中腺癌13例,鳞癌9例),术中留取患者癌组织、癌旁组织及外周血5 mL,同时选取健康查体患者22例,留取外周血5 mL.采用Real-time PCR法检测NSCLC患者癌组织、癌旁组织、外周血及健康查体者外周血中miR-367-3p的相对表达水平.培养肺癌细胞株(A549)与正常支气管上皮细胞(bronchial epithelium transformed with Ad12-SV402B,BEAS-2B)并检测细胞株中miR-367-3p表达水平.转染外源性miR-367-3p后采用MTT和Transwell实验观察转染前后A549细胞增殖和侵袭能力变化.采用生物信息分析miR-367-3p下游靶基因,采用Real-time PCR和Western blot检测转染外源性miR-367-3p前后锌指e-box-binding同源盒2(Zinc finger E-box binding homeobox 2,ZEB2)表达水平.结果 22例NSCLC患者,癌组织中miR-367-3p相对表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05),同时健康查体者血清中miR-367-3p水平显著高于NSCLC患者(P<0.05);分别以组织和血清中miR-367-3p的相对表达水平为参考,诊断NSCLC受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线下面积分别为0.95(95%CI:0.89-1.00)和0.85(95%CI:0.74-0.97);肺癌细胞株A549转染外源性miR-367-3p后,细胞增殖、迁移能力显著降低(P<0.05);生物信息预测miR-367-3p下游靶基因为ZEB2,上调miR-367-3p表达后,ZEB2基因表达水平降低(P<0.05).癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据分析ZEB2表达水平与NSCLC患者预后关系显示,ZEB2高表达组NSCLC患者总生存(overall survival,OS)和无疾病进展生存(disease free survival,DFS)与低表达组NSCLC差异无统计学意义(P>0.05),但高表达组显示出了OS及DFS降低的趋势.结论 miR-367-3p在NSCLC患者中表达下调,并通过靶向ZEB2基因参与NSCLC的增殖和侵袭生物学过程.
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