换一批
换一批hMAM与人HSP70融合基因真核表达载体的构建与表达
Construction and expression of eukaryotic expression vector containing human MAM and HSP70 fusion gene
摘要目的:构建人乳腺珠蛋白(hMAM)与人热休克蛋白70(hHSP70)融合基冈的真核表达载体pcDNA3.1-hMAM-HSP70,并观察重组载体在COS-7细胞中的表达,为肿瘤DNA疫苗研究奠定基础.方法:利用PCR方法扩增hMAM基因,经酶切测序分析后,与人HSP70基因克隆人真核表达载体pcDNA3.1,构建了融合基因真核表达载体pcDNA3.1-hMAM-HSP70.将重组载体电穿孔法转染入COS-7细胞,间接免疫荧光法检测目的基因的表达.结果:成功扩增了人HSP70基因与hMAM基因,酶切测序结果表明,重组载体含有hMAM与人HSP70的融合基因,在COS-7细胞中可检测到hMAM表达.结论:hMAM与人HSP70融合基凶的真核表达载体构建成功,为进一步进行DNA肿瘤疫苗研究提供了实验依据.
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