原核表达HPV16LI蛋白ELISA方法检测血清抗体
Detection of serum antibody of prokaryotic expression HPV16 L1 protein by ELISA
摘要目的:从感染人乳头瘤病毒(HPV)的新鲜宫颈癌组织中扩增HPV16型晚期蛋白L1基因全长,构建原核表达载体,表达并纯化蛋白用于ELISA检测.方法:根据基因序列设计-对特异引物,用PCR的方法从宫颈癌组织DNA中获得LI基因,以pet28a为载体构建表达质粒,IPTG诱导表达蛋白,DEAE及葡聚糖凝胶分离纯化目的蛋白,将蛋白包被平底96%孔板用于ELISA检测.结果:从宫颈癌临床标本克隆到HPV16型Ll蛋白编码序列,其原核表达产物纯化后可用于ELISA检测.结论:成功获得人有抗原性的HPV16 Ll蛋白,可用于ELISA检测.
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