5-氟尿嘧啶对人类绒癌JAR细胞增殖及凋亡的影响
Effect of 5-fluorouracil on proliferation and apoptosis of human choriocarcinoma JAR cells
摘要目的:研究5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5 -FU)对人类绒毛膜癌JAR细胞增殖及凋亡的影响.方法:MTT法检测5-FU对JAR细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测5-FU对JAR细胞DNA含量的改变;倒置显微镜及荧光显微镜下观察JAR细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变.结果:MTT抑制实验得出5-FU对JAR细胞的增殖具有一定程度的抑制作用,且抑制作用呈时间、剂量依赖性;5-FU 0μg/ml、20 μg/ml、40 μg/ml、60 μg/ml、80 μg/ml处理JAR细胞24 h,通过倒置光学显微镜可观察到JAR细胞的形态变化,可见随着5-FU浓度的增加,JAR细胞逐渐缩小、变圆、分散,细胞核减少;用流式细胞仪检测5-FU对JAR细胞DNA含量的改变发现:12 h均未诱导出凋亡,直到24 h5-FU处理组才诱导出凋亡,48 h由于JAR细胞耐酸性低,出现自溶现象,干扰实验结果,因此只选择24 h为实验时间点.0μg/ml(对照组),20μg/ml、40μg/ml、60 μg/ml15-FU处理JAR细胞24 h后,流式细胞术检测发现5 -FU处理组可诱导绒癌细胞凋亡.5-FU在0 μg/ml -40/ml范围内可以呈剂量依赖性促进JAR细胞凋亡,在40μg/ml~80 Wml范围内,凋亡反而降低.40μg /ml、60μg/ml 5-FU处理组凋亡率与对照组相比差异有统计学意义.在0μg/ml~80μg /ml范围内5-FU处理组细胞坏死增加,呈剂量依赖性.坏死率高于不加5-FU的对照组,差异具有统计学意义;Hoechst33342/PI荧光染色结果显示,典型的细胞凋亡形态学改变,可见典型的凋亡小体,表现为核染色质聚集、核固缩、核碎裂.20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml.80μg/ml各处理组的凋亡率均显著高于对照组(P<0.01).80μg/ml处理组的坏死率也显著高于对照组.结论:5-FU对JAR细胞的增殖具有一定程度的抑制作用,5-FU对绒毛膜癌JAR细胞有凋亡诱导作用.
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