换一批
换一批人WFDC2启动子荧光素酶报告基因载体的构建及其在卵巢癌H08910细胞中的活性鉴定
Construction of human WFDC2 promoter luciferase reporter gene vector and identification of its activity in ovarian cancer H08910 cells
摘要目的:构建WFDC2启动子荧光素酶报告基因重组质粒PGL3-WFDC2-Promoter,并进行功能鉴定.方法:通过PCR的方法,从H08910细胞基因组DNA中获得WFDC2基因编码序列上游的WFDC2启动子序列;软件分析WFDC2启动子的结构,选取调控密集区域,克隆到报告基因pGL3载体上,构建WFDC2启动子的报告基因载体;用脂质体转染法将2个报告基因载体分别转染至卵巢癌H08910细胞系;采用双荧光素酶报告基因系统评估WFDC2启动子活性.结果:PCR方法成功钓取WFDC2启动子片段,测定其编码序列及读框正确,酶切鉴定亚克隆序列正确,瞬时转染H08910后经报告基因检测,两段启动子均具有转录活性.结论:成功构建了WFDC2启动子的报告基因载体,为进一步研究WFDC2启动子和卵巢癌的关系奠定了实验基础.
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栏目名称
实验与基础研究
发布时间
2011-11-14
基金项目
广东省卫生厅医学科研基金
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