血管紧张素Ⅱ诱导HEK293细胞增殖中Ca2+的变化及意义
Change and significance of Ca2+ concentration in proliferation of HEK293 cells induced by angiotensin Ⅱ
目的:建立血管紧张素Ⅱ( AngⅡ)诱导人胚肾细胞(HEK293)增殖模型,检测增殖效果与Ca2+变化及TR-PC6的表达,并观察氯沙坦(Losartan)的干预作用.方法:用不同浓度AngⅡ( 10 -8 mol/L、10 -7 mol/L、10 -6 mol/L、10-5mol/L)诱导细胞,在不同时间(0h、6h、12h、24 h、48 h),采用MTr法及台盼蓝法检测细胞增殖及活性,确定最适浓度及时间构建增殖模型.予Losartan干预24h后用激光扫描共聚焦显微镜测Ca2+变化,RT -PCR、Western Blot检测TRPC6表达情况.结果:AngII10 -6mol/L诱导HEK293 24h后细胞增殖及Ca2+升高明显,Losartan干预后细胞增殖及Ca2+明显下降.TRPC6表达 (+/-),胞膜、胞质定位不清.结论:AngⅡ诱导HEK293细胞增殖与Ca2+升高有关,具有一定的时间和剂量依赖性.Losartan抑制细胞增殖及Ca2表达下降可能与AT1R作用相关.HEK293细胞自身无明显表达TRPC6,可利用此表达系统进一步研究外源性TRPC6与Ca2变化的关系.
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