肿瘤相关成纤维细胞促进卵巢癌腹水肿瘤细胞侵袭能力

Promoting effect of cancer-associated fibroblasts on invasion of ovarian cancer cells in ascites

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摘要目的检测卵巢癌患者腹水中肿瘤相关成纤维细胞(CAF)含量,并探讨其对卵巢癌肿瘤细胞侵袭能力的影响.方法从20例卵巢癌腹水中分离细胞后,流式检测其中α-SMA细胞阳性率并分为高低两群.在TCGA数据库557例卵巢癌标本数据库中验证α-SMA与上皮间质转化(EMT)相关的转录因子(SNAI1、TWIST1、ZEB1)的相关性;在mRNA和蛋白水平比较以上两群中肿瘤细胞上皮间质转化程度;磁珠分选成纤维细胞贴壁后α-SMA免疫荧光观察其形态;Western Blot验证SKOV3细胞系与人胚肺成纤维细胞系MRC5体外悬浮共培养后EMT程度的改变,Transwell和系膜清除试验验证在悬浮共培养状态下MRC5对SKOV3侵袭能力的影响.结果卵巢癌腹水中α-SMA阳性细胞占腹水细胞(34.40±18.67)％;TCGA数据库中α-SMA与上皮间质转化相关的转录因子显著正相关(r值分别为0.3470、0.5262和0.7002,P＜0.01);实时定量PCR (qRT-PCR)及Western Blot验证α-SMA-H组中肿瘤细胞EMT程度较α-SMA-L组更高;腹水中成纤维细胞贴壁免疫荧光成高表达α-SMA的间质样细胞形态;体外悬浮共培养后,MRC5促进SKOV3的EMT和系膜清除能力.结论卵巢癌腹水中存在CAF并可以促进卵巢癌腹水中肿瘤细胞EMT和侵袭能力.