摘要目的 探索在G6PC在体外对卵巢癌细胞生长的作用及其对卵巢癌细胞周期的影响,评价G6PC在卵巢癌治疗中可能存在的潜力.方法 利用shRNA稳定转染技术及G6PC特异性抑制剂(4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-C]吡啶盐酸盐)在OVCAR3人卵巢癌细胞株中抑制G6PC的表达.通过Western blotting及qRT-PCR技术检测shRNA的沉默效果以及4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-C]吡啶盐酸盐对G6PC的抑制作用以及CDKN1B、CDK2蛋白水平改变.检测阻断G6PC前后细胞糖代谢中关键酶糖原合成酶(GYS1)、糖原磷酸化酶(PYGL)以及关键代谢产物糖原水平的改变.对G6PC从基因水平及药物水平进行阻滞后,通过结晶紫实验、Transwell实验和软琼脂实验检测细胞增殖、迁移侵袭和非停泊性生长能力的改变,评价G6PC对卵巢癌细胞生长的影响.最后利用流式细胞技术对shG6PC对卵巢细胞周期、凋亡的影响作进一步探究.结果 体外shRNA沉默G6PC后,卵巢癌细胞的增殖、迁移、侵袭和非停泊性生长能力降低.在抑制卵巢癌细胞生长方面,应用20 μM的G6PC特异性抑制剂(4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-C]吡啶盐酸盐)可以达到与基因水平阻断相似的效果.阻断G6PC后,胞内GYS1及PYGL发生改变,细胞内糖原累积,提示细胞糖异生功能的损伤.G6PC沉默引起了CDKN1B编码蛋白p27磷酸化水平增加.在细胞周期实验中,沉默G6PC使G1/S期卵巢癌细胞比例上升,卵巢癌细胞更多停滞于G1期.而在细胞凋亡方面G6PC抑制组与对照组并无显著差异.结论 通过shG6PC和4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-C]吡啶盐酸盐对G6PC进行抑制可影响卵巢癌细胞的糖代谢,同时降低了肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭以及非停泊性生长的能力.G6PC沉默可使CDKN1B磷酸化蛋白的水平升高.CD-KN1B蛋白磷酸化水平升高可能是导致细胞趋于停滞在G1期的原因.