换一批
换一批重组人源性肝细胞生长因子的纯化及其生物学活性的初步研究
Purification of the recombinated human hepatocyte DNA synthetic stimulating factor and preliminary research of its biological activity
摘要目的获取高纯度的重组人源性肝细胞生长因子(rhHDSSF),并探讨rhHDSSF在体外的生物学活性.方法收获大量培养的表达细胞,以冻融法提取蛋白质;以IMAC pH递减非变性法纯化表达的rhHDSSF;以MTT法测定其对HepG2,T24,Fibroblast和Hela细胞的增殖效应.结果从细胞裂解物中纯化得到20 kD左右的单一蛋白条带,其纯度达89%.细胞增殖实验证实这一蛋白产物对HepG2,Hela细胞有显著的增殖作用,并表现出良好的量效和时效关系,而对T24,Fibroblast细胞则增殖效果不明显.结论本研究证实,人源性肝细胞生长因子(HDSSF)转染细胞株中有20 kD左右HDSSF相应蛋白表达,与HDSSF 598 bp开放读码框理论值相一致,且纯度达89%,并发现其有良好的细胞增殖作用.rhHDSSF是一种非特异性促细胞增长物质,但它也有一定的选择性,这可能与不同细胞表达的细胞受体差异而导致蛋白信号传导不同有关.
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