换一批
换一批核酸纯化对蝎型探针定量PCR准确检测结核分枝杆菌DNA的必要性研究
Necessity of selecting methods of extracting bacteria DNA to detect Mycobacterium tuberculosis by fluorescence quantitative PCR using duplex scorpion primer
摘要目的 探讨经煮沸、Chelex 100 树脂处理、核酸纯化三种方法平行处理的标本在进行结核分枝杆菌蝎型探针荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测中的有效性,以得到标本的最佳处理效果.方法 收集42例结核确诊患者的多种标本和14例非肺结核患者的痰标本,对其分别用上述3种方法平行处理后,采用蝎型探针荧光定量PCR法进行检测,并分析其结果.结果 核酸纯化法处理的标本阳性检出率为100%,明显高于煮沸法57.14%和Chelex 100 树脂法52.38%(分别为P=0.0103,P=0.0233);尤其是外观呈血性和菌阴性的标本,采用核酸纯化法处理标本后检测所得结核DNA量较其他方法处理所得量高约1～2个数量级.结论 标本的处理对于结核分枝杆菌蝎型探针荧光定量PCR检测十分重要,煮沸(裂解)法和Chelex 100 树脂法不适合用以处理临床标本,而应使用核酸纯化法.
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