换一批
换一批白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶Sap2多克隆抗体的制备、纯化及鉴定
Preparation, purification and identification of polyclonal antibody against secretory aspartyl proteinase 2 of Candida albicans
摘要目的 制备白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶Sap2多克隆抗体,并对其进行鉴定.方法 提取白假丝酵母菌基因组DNA为模板,经聚合酶链反应(PCR)获取SAP2目的基因;双酶切SAP2基因与原核表达载体pMAL-c2x(+),构建pMAL-c2x/SAP2重组质粒;在大肠埃希菌BL21 (DE3)感受态细胞中经IPTG诱导表达出可溶性的融合蛋白;用可溶性Sap2免疫小鼠制备抗血清,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗血清效价,亲和层析法纯化抗血清后,利用Western免疫印迹(Western Blot)检测抗体特异性.结果 该研究成功制备了抗Sap2多克隆抗体,抗体效价＞1∶51 200;Western Blot检测结果表明,该抗体可特异性识别Sap2蛋白.结论 纯化后的Sap2作为抗原免疫小鼠,有较好的抗原性和免疫原性,可成功制备多克隆抗体,并具有高特异性,为快速检测侵袭性白假丝酵母菌感染奠定了基础.
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关键词
白假丝酵母菌分泌型天冬氨酸蛋白酶多克隆抗体抗原抗体Candida albicanssecretory aspartyl proteinaseplyclonal antibodyantigenantibody
分类号
R392.11
栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1671-9638.2013.04.001
发布时间
2013-09-16
基金项目
国家自然科学基金项目
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