结核分枝杆菌菌悬液光密度值与菌落计数的关联性
Correlation between optical density and colony forming units of Mycobac-terium tuberculosis suspension
摘要目的:建立一种基于光密度值计算结核分枝杆菌菌落数的可靠方法。方法利用低频超声和玻璃珠研磨两种方法制备H37Ra 菌悬液,菌悬液2倍梯度稀释后,分别测定各个稀释度菌悬液在600 nm 处的光密度值(OD600值),并分析 OD600值与稀释倍数曲线,确定最佳的菌悬液制备方法,OD600线性范围,以及 OD600值与CFU 关联曲线。结果 OD600值为0.1~0.6,线性范围内 OD600值与稀释倍数线性回归分析结果显示,玻璃珠研磨法和低频超声法相关系数(R2)分别为0.98、1.00,均呈良好的相关性,且低频超声法比玻璃珠研磨法的相关性好,其菌液分散更均匀。OD600值与 CFU 值线性回归分析结果显示,玻璃珠研磨法和低频超声法回归方程分别是:CFU=2.35×107×OD600+4.42×105、CFU=3.26×107×OD600+6.89×105。结论低频超声法是一种较好的结核分枝杆菌菌悬液制备方法,结合 OD600值测定,可成为一种可靠、快速的结核分枝杆菌定量方法。
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