换一批
换一批重组转化因子β1的表达及修复骨缺损的研究
Expression of Recombinant Mature Peptide of Human Transforming Growth Factor-β1(TGF-β1) in Escherichia Coli and A Study of TGF-β1 in Repairing Bone Defects
摘要目的运用基因重组的方法,对人TGF-β1的进行基因克隆,在大肠杆菌中表达,并进行重组TGF-β1修复骨缺损的实验研究.方法以pBV220作为原核细胞表达载体,将TGF-β1 cDNA片段定向重组到pBV220的多克隆位点上,构建原核细胞表达质粒pTGF-β1并转化至大肠杆菌中进行温度诱导表达.在兔顶骨两侧各制造直径为10mm的骨缺损,左侧缺损植入纤维蛋白加重组TGF-β1 100ug作为实验组,右侧缺损单纯植入纤维蛋白作为对照组,术后进行组织学和平均灰重测定.结果表达产物经SDS-PAGE分析,该表达体系可高效表达TGF-β1,其表达产物占菌体可溶性蛋白的23%,用NRK细胞检测本研究生产的TGF-β1具有该蛋白的野生活性.实验组缺损区组织学及平均灰重明显优于对照组(P＜0.05).结论 TGF-β1原核表达体系的建立为TGF-β1的生产提供了高效的表达工程菌,重组TGF-β1能有效地修复骨缺损.
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主题词
研究(Research)转化生长因子β(Transforming Growth Factor beta)骨疾病(Bone Diseases)基因重排(Gene Rearrangement)基因(Genes)
分类号
R68
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1003-0034.2000.12.005
发布时间
2004-01-08
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