体外负压培养对骨髓间充质干细胞成骨活性的影响
Effects of negative pressure on osteogenesis in human bone marrow-derived stroma cells cultured in vitro
摘要目的:探讨体外负压培养对骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived stroma cells,BMSCs)成骨活性的影响.方法:取第3代BMSCs分为实验组和对照组,实验组进行间歇性负压培养,设置压力为17 kPa,每次30 min,每日4次,干预2周;对照组于普通CO2培养箱中常规培养.倒置显微镜下观察细胞形态,检测ALP活性,免疫组织化学检测Ⅰ型胶原的表达,RT-PCR检测2周后以及终止负压后l、2、3d骨保护素(osteoprotegerin,OPG) mRNA和骨保护素配体(osteoprotegerin ligand,OPGL) mRNA表达水平.结果:诱导2周后,BMSCs呈现出显著的成骨细胞特性,与对照组比较,ALP活性显著增加,Ⅰ型胶原表达阳性,实验组细胞OPG mRNA表达水平显著提高,OPGL mRNA表达水平显著降低,且差异均有统计学意义(P<0.05).负压终止后3d,两组细胞OPG mRNA和OPGLmRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论:体外负压培养可以提高BMSCs成骨活性.
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