股密葆含药血清对高浓度地塞米松干预后成骨细胞增殖分化作用的影响

Effects of serum containing Gumibao (股密葆) on the proliferation and differentiation of osteoblast induced by dexamethasone

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摘要目的:观察股密葆含药血清对高浓度地塞米松干预后成骨细胞增殖分化的影响.方法:用多次酶消化法分离出生24 h内新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞,P1代细胞进行实验.将不同浓度地塞米松(0、10-8、10-7、10-6、10-5、10-4 mol/L)干预成骨细胞,1周后进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色,3周后进行矿化结节染色.根据上述实验结果,进一步选择10-5 mol/L地塞米松干预成骨细胞1周,继而改换空白鼠血清及高、中、低浓度股密葆含药血清培养基,培养1周后进行ALP染色,Western-blot检测Ⅰ型胶原及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达,培养2周后进行矿化结节染色.结果:生理浓度地塞米松(10-8 moL/L)可促进成骨细胞ALP的表达及矿化结节产生,而高浓度地塞米松(10-7～10-4 mol/L)可抑制上述结果,股密葆含药血清可逆转高浓度地塞米松对成骨细胞ALP、矿化结节、Ⅰ型胶原及PCNA的抑制作用.结论:高浓度地塞米松可抑制成骨细胞增殖分化,而这种抑制作用可被股密葆含药血清逆转.