补肾活血方含药血清对离体兔脊柱运动节段压力退变模型的影响

Effect of serum of Bushen Huoxue prescription（补肾活血方）on rabbit with intervertebral disc motion segments in vitro culture

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摘要目的:观察补肾活血方含药血清对离体兔脊柱运动节段压力退变模型的影响.方法:将24只4～6月龄体重为2.5～3 kg的新西兰白兔,根据随机数字表分为合药组与对照组,每组各7只,处死后在无菌条件下分别取出脊柱运动节段各28个,均放入脊柱运动节段离体加载和培养装置中进行培养,其中含药组与对照组培养液中分别含有10％补肾活血方含药血清与10％无药血清,于培养前及培养后第3、7、14天,两组各取7个椎间盘分别进行组织形态学、蛋白多糖PAS/AB特染、Ⅱ型胶原免疫组化和Agg与Col2aI的Real-time PCR检测.结果:组织形态学检测示培养1周内含药组较对照组形态维持更好;PAS/AB检测示两组蛋白多糖含量均减少;免疫组化示含药组Ⅱ型胶原含量3d时较对照组明显升高(P＜0.05);1周后虽明显降低,但仍较对照组显著(P＜0.05);RT-PCR显示两组培养3d后Agg表达较术前显著下降(P＜0.05)(P＜0.01),两组7d与14 d时比较差异无统计学意义(P＞0.05);两组3d时Col2aI表达均明显上调,且含药组表达更加显著(P＜0.01),7d后两组虽明显下降(P＜0.05),但含药组比对照组仍表达显著(P＜0.05),14d时两组表达水平均较低,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:补肾活血方含药血清短期内能一定程度上延缓椎间盘退变,可能与该方改善循环、抑制炎性、调节细胞外基质有关,提示本方对椎间盘退变有早期防治作用.