摘要目的 检测刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)棒状体蛋白17 (rhoptry protein 17,ROP17)对γ干扰素(IFN-γ)诱导的小鼠单核巨噬细胞(J774A.1)凋亡的调控作用. 方法 将重组质粒p3 ×Flag-CMV-14/TgROP17和p3×Flag-CMV-14空质粒(对照组)转染J774A.1细胞后,加入重组IFN-γ诱导细胞凋亡,通过流式细胞术和蛋白质印迹(Western blotting)检测ROP17对细胞凋亡的调控作用,检测c-Jun磷酸化水平及活化形式的半胱天冬酶3 (Caspase 3)、Bcl-2、Bcl-xL和Bcl-3等凋亡相关蛋白的表达情况.J774A.1细胞共转染p3×Flag-CMV-14/TgROP17和c-Jun shRNA,加入重组IFN-γ诱导细胞凋亡,Western blotting检测ROP17对凋亡的调控作用及凋亡相关蛋白Bcl-3的表达. 结果 流式细胞术显示,过表达ROP17组细胞凋亡率为(3.73±0.51)％,明显低于对照组的(7.78±1.10)％(P＜0.05).Western blotting结果显示,过表达ROP17组磷酸化c-Jun蛋白相对表达量为0.196±0.028,对照组为0.075±0.010 (P＜0.05);Bcl-3相对表达量为0.461±0.063,对照组为0.108±0.013(P＜0.05).活化形式的Caspase 3相对表达量为0.015±0.004,对照组为0.174±0.026 (P＜0.05).Bcl-2在过表达ROP17组和对照组中的相对表达量分别为0.119±0.013和0.117±0.018,Bcl-xL则分别为0.124±0.015和0.121±0.023,差异均无统计学意义(P＞0.05).在c-Jun shRNA有效抑制c-Jun及其磷酸化表达的条件下,活化形式的Caspase 3在RNA干扰组和对照组的相对表达量分别为0.147±0.024和0.087±0.010 (P＜0.05),Bcl-3则分别为0.085±0.010和0.162±0.011 (P＜0.05). 结论 ROP17抑制IFN-γ诱导的J774A.1细胞凋亡依赖于c-Jun的磷酸化及Bcl-3的表达.